Tecnología del DNA recombinante

La TÉCNICA DEL DNA RECOMBINANTE sirve para obtener un CLON DE GENES (Numerosas copias idénticas) a partir de un gen original "in vivo".
 

Los pasos que se deben dar son los siguientes:

1. Obtención de un fragmento de DNA que contiene el GEN. Para seleccionar el gen se emplean ENZIMAS DE RESTRICCIÓN procedentes de bacterias, que son capaces de cortar el DNA en puntos concretos, correspondientes a secuencias de reconocimiento, se consiguen así pequeños fragmentos de DNA portadores del GEN en cuestión.
2. Inclusión de ese GEN en una molécula de DNA (Vector de clonación). Se utiliza para ello un PLÁSMIDO (DNA bacteriano cíclico distinto del cromosoma bacteriano que se replica independientemente, puede haber de 20 a 50 en una sola bacteria) o un GENOMA VIRAL (Cortados también por los mismos ENZIMAS DE RESTRICCIÓN).
3. Introducción del VECTOR DE CLONACIÓN  con el GEN en una célula de un organismo diferente (Célula HOSPEDADORA) , que ha de ser de fácil manejo y cultivo, Se suelen utilizar para ello procariotas como Escherichia coli o Bacillus subtilis o eucariotas como Saccharomyces cerevisiae , y se puede conseguir por dos procedimientos:
   

   Por TRANSFORMACIÓN  en procariotas (Las bacterias toman espontáneamente el DNA del medio)

   
   

   Por TRANSDUCCIÓN en células eucariotas (Utilizando virus bacteriófagos

                     desprovistos de los genes que producen la lisis celular BACTERIÓFAGO LAMBDA)
4. Multiplicación de la célula hospedadora y obtención de gran número de copias del GEN en cuestión.(AMPLIFICACIÓN DEL GEN)

Amplificar un gen permite a los científicos tener muchas copias del gen para su estudio. La técnica del DNA recombinante se ha utilizado para:

- el desarrollo del Proyecto Genoma Humano,

- para el diagnóstico prenatal de enfermedades genéticas,

- para la evaluación de la susceptibilidad de los integrantes de una familia a padecer determinados

  tipos de cáncer,

- en medicina forense para el estudio de muestras de sangre, semen, saliva, células epiteliales, etc.,

- en la obtención de organismos transgénicos para la agricultura: vegetales resistentes a hongos,

  bacterias, insectos o pesticidas,

- para la producción de vacunas contra la hepatitis B o el papiloma humano,

- en la producción de diversas proteínas de interés: insulina, interferón, interleucinas, hormonas, etc.